As doenças alérgicas respiratórias vêm aumentado a cada ano, representando um grave problema econômico e de saúde pública.^2,3 Investigações recentes têm mostrado que ILC2s tem um papel fundamental na fisiopatologia da inflamação alérgica.⁴ As ILC2s podem ser ativadas por diversos mediadores, devido ao seu amplo repertório de receptores, como as alarminas IL-33 e IL-25, além de neuropeptídeos. Durante a inflamação, lesões teciduais liberam esses mediadores, que ativam as ILC2s, levando à produção rápida de citocinas do tipo 2, tais como IL-4, IL-5 e IL-13. Essas citocinas promovem respostas inflamatórias em diferentes tipos de células adjacentes.^5,6 Como esperado, tais citocinas induzem migração de eosinófilos, no entanto, estudos relatam a presença de neutrófilos nas vias aéreas de pacientes com asma grave e em modelos experimentais de inflamação alérgica,^7,8 sendo desconhecido o mecanismo pelo qual as ILC2s regulam a infiltração de neutrófilos nas vias aéreas durante a inflamação.

Para investigar esse fenômeno, os pesquisadores utilizaram linhagens de camundongos geneticamente modificadas que eram destituídas de ILCs, induzindo-se inflamação alérgica por administração intranasal de IL-33. Diferente do que acontecia em camundongos “normais” (WT), os quais apresentavam um aumento significativo de neutrófilos no líquido de lavagem broncoalveolar (BALF), os camundongos desprovidos de linfócitos T e B e ILCs não apresentaram tal resposta. Quando esses camundongos desprovidos linfócitos e de ILCs receberam a transferência adotiva de ILC2s antes do tratamento com IL-33, passaram a apresentar a infiltração de neutrófilos no BALF após esse estímulo. Além disso, a administração do sobrenadante de ILC2s ativadas diretamente no trato respiratório induziu a migração de neutrófilos, reforçando o papel dessas células no processo inflamatório.

Outro experimento revelou que o sobrenadante de ILC2s ativadas com IL-33 induzia a quimiotaxia de neutrófilos em ensaios de migração transwell. Quando o sobrenadante foi tratado com proteinase K, a atividade quimiotática foi completamente bloqueada, indicando que proteínas secretadas pelas ILC2s eram responsáveis pelo recrutamento. Análises do sobrenadante identificaram o HMGB1 como uma proteína-chave com alta atividade quimiotática. Estudos in vitro e in vivo mostraram que o HMGB1 ativa neutrófilos, induzindo a expressão de CXCL2, uma quimiocina que amplifica o recrutamento neutrofílico.

Para investigar o papel do HMGB1, camundongos Hmgb1^flox/flox foram cruzados com animais Cre específicos para ILC2s, criando linhagens com ILC2s deficientes em HMGB1. Em camundongos desafiados com IL-33, a ausência de HMGB1 em ILC2s reduziu significativamente a infiltração de neutrófilos no BALF e a inflamação tecidual nos bronquíolos, além de diminuir os níveis de CXCL2. Esses resultados destacam o HMGB1 como um mediador essencial para a amplificação da resposta inflamatória.

Os pesquisadores também exploraram o papel das GLs na secreção de HMGB1. ILC2s ativadas com IL-33 exibiram um aumento significativo na formação de GLs, que estavam diretamente associadas à secreção de HMGB1. Em camundongos deficientes no gene Hilpda, responsável pela formação de GLs, observou-se uma redução marcante na secreção de HMGB1 e na infiltração de neutrófilos. Esses achados indicam que as GLs são essenciais para o transporte e liberação de HMGB1 no ambiente inflamatório.

Análises proteômicas mostraram que o HMGB1 se associa à superfície das GLs e ensaios de quimiotaxia confirmaram que o sobrenadante contendo GLs carregadas com HMGB1 tem alta capacidade de atrair neutrófilos. Além disso, GLs extracelulares foram detectadas no BALF de camundongos com inflamação alérgica induzida por IL-33.

Em suma, o estudo revelou que as ILC2s desempenham um papel central na inflamação alérgica ao liberar GLs carregadas com HMGB1, promovendo a quimiotaxia e ativação de neutrófilos (Figura 1). Esses achados destacam as GLs como plataformas essenciais para a sinalização imunológica, apontando para novos alvos terapêuticos no manejo de doenças respiratórias alérgicas, como a asma.

Figura 1. Alérgenos inalados interagem com o epitélio das vias aéreas, induzindo a liberação de IL-33, uma alarmina que ativa as ILC2s residentes. Além de secretar citocinas do tipo 2, como IL-5 e IL-13, o que promove a infiltração de eosinófilos, as ILC2s acumulam e liberam gotículas lipídicas contendo HMGB1, uma proteína que estimula a produção de CXCL2, levando ao recrutamento e infiltração de neutrófilos no tecido pulmonar. Esse processo contribui para a resposta inflamatória exacerbada observada em condições alérgicas, como a asma.

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